电化学发光免疫分析法检测血浆C肽的临床评价方法介绍

发布网友 发布时间：2024-10-24 13:34

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热心网友 时间：2024-10-29 13:27

电化学发光免疫分析法（ECLIA）在检测血浆C肽的临床评价方法中展现出了显著优势。C肽作为胰岛β细胞分泌的一种等克分子肽类物质，在体内清除缓慢，不受外源型胰岛素影响，因此在评估胰岛β细胞功能时，C肽比胰岛素更准确且稳定。目前，C肽的测定方法包括酶联免疫分析（ELISA）、放射免疫分析（RIA）及ECLIA等多种方法。本研究旨在对ECLIA法测定C肽进行初步临床评价，以探讨其在临床应用中的价值。

在材料与方法中，选用的试剂包括全自动电化学发光免疫分析仪（瑞士Roche公司的Elecsys 2010）、C肽测定用配套试剂和定标品。同时，酶联免疫分析法的试剂盒来自北京尚柏生物医学技术有限公司，测量仪器为芬兰的MK2型酶标仪，质控品为美国BIO-RAD公司的免疫分析质控品。对于标本的收集，选取了80例确诊的糖尿病患者，其中男性48例，女性32例，年龄范围在42岁至71岁，平均年龄为57岁。所有患者均无肝肾等急慢性疾病史，且在检测前停用胰岛素治疗，口服降糖药物治疗者在停药3天后采血。血浆样本被置于-20℃冰箱中待测。

在方法上，严格遵照试剂盒说明书进行操作，确保检测的准确性。进行精密度试验、线性试验、相关性试验和回收试验等评价试验，以全面评估ECLIA法的性能。结果表明，ECLIA法在精密度试验中的批内平均变异系数（CV）为2.13%，而ELISA法的批内平均CV高达10.8%。在批间误差的测试中，ECLIA法的平均批间CV为4.27%，ELISA法的平均批间CV为16.5%。ECLIA法在检测高、中、低浓度标本时，线性关系优于ELISA法。相关性试验显示两种方法的相关系数为0.987，具有良好的相关性。回收试验的结果表明，ECLIA法的平均回收率为98.9%，而ELISA法为91.9%。灵敏度试验中，ECLIA法的最小可测量值为0.01 ng/ml，ELISA法为0.06 ng/ml。此外，ECLIA法与ELISA法所测C肽含量与胰岛素的相关性分析显示，两种方法具有良好的相关性，相关系数分别为0.96和0.89，统计学差异不显著。

讨论部分指出，C肽由31个氨基酸组成，与胰岛素共同存在于同一颗粒囊内，以等分子分泌。C肽的消除速率慢，半衰期为20分钟。尽管最初被认为无生物活性，但目前认为C肽是一种具有多种生物学活性的肽类激素，对评估胰岛β细胞功能具有重要价值。ECLIA法作为第四代化学发光免疫分析，集电子发光技术、纳米微粒子技术、生物素-亲和素系统、抗原-抗体免疫反应、电磁场分离整合于一体，具有高度灵敏性、特异性，且整个反应过程在全自动封闭体系中进行，不受人为操作误差的影响。实验结果证明，ECLIA法在检测血浆C肽的精密度、线性、回收率、抗干扰能力等方面均优于ELISA法。此外，ECLIA法与ELISA法所测C肽含量与胰岛素含量的正相关性，表明两种方法均可用于评价胰岛β细胞功能，而ECLIA法的检测范围更宽、检测时间更短，更符合临床需求。因此，电化学发光免疫分析法在检测C肽方面具有重要临床应用价值。

C肽（Connecting Peptide，CP）又称连接肽，与胰岛素都是由胰岛β细胞分泌，并从胰岛素原分裂而成的等克分子肽类物质。其在体内清除率慢，几乎不被肝脏所摄取，且不受外源型胰岛素影响。