快速气相色谱法测定食品中的常见防腐剂

黄智玉

【摘 要】随着人们对于自身健康愈来愈多的关注，食品安全问题已经显而易见的被提上了日程，本文通过快速气相色谱法对于食品中常见的一些防腐剂进行了检测和分析，希望可以为食品中防腐剂的检测工作提供一些参考。 【期刊名称】《食品安全导刊》 【年(卷),期】2014(000)020 【总页数】2页(P47-48)

【关键词】快速气相色谱法;食品;防腐剂;山梨酸;苯甲酸;对羟基苯甲酸酯 【作 者】黄智玉

【作者单位】广西产品质量监督检验研究院 【正文语种】中 文

防腐剂作为一种化学物质，通常在食品生产加工以及贮藏等时候会做少量的加入，这样能够使得微生物的繁殖得到抑制从而保持食品的鲜度。但是国标中对防腐剂加入量有着严格的限制，否则不仅会给人体带来伤害甚至导致人体中毒，所以我国对于食品中防腐剂的添加实行着严格的监督和控制。在食品、化妆品甚至药品中，对羟基苯甲酸酯、苯甲酸与苯甲酸钠以及山梨酸与山梨酸钾类的防腐剂应用比较广泛，而实验证明这类防腐剂会损害人体，所以一定要对其进行有效检测。如今已经有了

胶束电动毛细管色谱法、高效液相色谱法、薄层色谱法、分光光度法、毛细管电色谱法、气相色谱法等方法来测定防腐剂。然而，薄层色谱法分析的时间长，精确度不高；高效液相色谱法的仪器价格太过高昂，普及困难；毛细管电泳方法不能够重复使用，使得分析有所困难。

近年来，快速气相色谱法作为一种新技术已经得到广泛使用。这种方法用细口径、弱极性的毛细管色谱柱，选取乙醇作为萃取样本的溶剂，用苯二酚作为内标，能够在1.3min内测定出食品中的防腐剂（例如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸、山梨酸），这种方法在检测时能够迅速分离且灵敏度也很高，这就大大缩短了时间而且降低了成本。在实际中也已经的到了很好地运用。 1 实验部分 1.1 仪器与色谱条件

美国安捷伦公司有一款型号为HP6890的气象色谱仪，简单的说，它使用的是氢火焰离子化检测器（FID）,HP-5熔融石英毛细管色谱柱的规 格 是 :10

m×0.10mm×0.1μm；在进样口时是260℃的温度；色谱室温度的操作程序：开始保持0.2min的160℃的温度；以120℃/min的速率升温，最终到280℃并保持0.1min。检测器为290℃，载气为H2，色谱柱线是50cm/s的流速，空气流量300mL/min，检测器氢气流量30 mL/min，尾吹气（N2）为30mL/min的流量，分流比230:1，进样体积单位是μL。 1.2 标准溶液配制标准

将对苯二酚、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、苯甲酸、山梨酸每样都准确的称250m左右，然后用无水乙醇定为9.356-10.21 mg/mL质量浓度的溶液25ml。然后进行稀释，分别配置质量浓度为37.42- 40.45、56.14 -61.27、74.85 - 81.70、93.56- 102.1、187.1 -

204.2μg/mL的溶液，其中的对苯二酚的脓毒都是98.56μg/mL。最后就可用这些溶液与储备液一起测定防腐剂的含量，是否过线。

表1 6种防腐剂的曲线回归方程和线性相关系数组分 回归方程 相关系数SA Y=1.63X-0.65 0.9948 BA Y=1.68X-0.64 0.9989 MP Y=1.87X-0.75 0.9959 EP Y=1.93X-0.79 0.9959 PP Y=2.123X-0.88 0.9958 BP Y=1.97X-0.76 0.9957 1.3 试验前的样品处理

随便购买十种液体类食品。都提取其中的1g作为待测样品置于离心管里面，加入5mL的乙醇和250μL的内标液，使用HCI使其PH值酸化至2.5，提取30min的超声，再进行15min的离心，提取上清液进行定容，至25mL就可以对其分析了。 2 结果

2.1 分析条件以及色谱图

为了使极性柱分离山梨酸和苯甲酸和一些比较严重的缺点，使分析的速度更快，就得利用HP-5熔融石英毛细管色谱柱。可以使用甲醇、丙酮和乙醇等溶剂。但是甲醇含有较大的毒性会损伤色谱柱，而丙酮有较弱的记性，使得溶剂出峰较晚，与待测的成分重叠起来。所以只能选用乙醇。

由于对苯二酚的保留时间是在对羟基苯甲酸甲酯和苯甲酸两者之间的，而且它里面含有与防腐剂结构相似的苯环，所以选择它。实际样品检测时并不含有对苯二酚，检测加入的是质量浓度为98.56μg/mL的内标。

分流比也是非常重要的数据，对其也进行实验，界定的范围是20:1 到250:1。实验结果显示，越大的分流比使得分离的结果越明显，这是因为它能够使得溶剂峰的拖尾得以消除。然而过高的分流比也会对结果造成不利的影响。所以要充分考虑分析速度、分离度以及灵敏度，确定了最佳的分流比是230:1。然后优化载气速度和柱温程序，知道了最佳分析组合是苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸酯类防腐剂。常见防腐剂在1.3min就能够进行分离，而且检测时灵敏度也会较高，效果也会较明

显。

2.2 线性范围与检出限值

六种防腐剂在色谱条件下能够得到很好地分离。要测定它们的线性范围与检出限值，就要分析不同浓度的标准溶液，最后划出横轴X为防腐剂和内标的质量浓度比纵轴Y为其峰面积比的曲线，两者有比较好的线性关系，线性回归方程如表一。检出限可以按照基线噪声的三倍的色谱峰高计算：苯甲酸为2.5μg/mL；山梨酸为10μg/mL；对羟基苯甲酸酯为1.2μg/mL。苯甲酸（2.5μg/mL）、山梨酸（10μg/mL）、对羟基苯甲酸丙酯（1.2μg/mL）。

表2 6种防腐剂加标回收率计算结果防腐剂 背景值 加入量 测定值 回收率 相对标准偏差Pl(μg/ml) Pl(μg/ml) Pl(μg/ml) /% /%SA -- 98.57 89.12 90.42 1.58 BA 46.18 102.2 124.56 76.72 0.92 MP -- 97.82 98.85 101.12 0.46 EP -- 99.94 99.22 99.12 0.45 PP -- 99.86 103.2 103.35 1.06 BP -- 93.57 101.24 108.12 1.68

2.3 精密度与回收率

首先分别把质量浓度值为93.56-102.1μg/mL的标准溶液和56.14-61.27μg/mL的标准溶液（其中内标物对苯二酚浓度均为98.56μg/mL）重复的进样7次和6次，并且就结果的精密度进行精密的计算。前者的测定结果显示：RSD小于5%，后者的测定结果显示：RSD小于2%（数据略过）。

在计算准确度的时候采用的是加标测定回收率的方法。选择好样品后，分别加入一定数量的6种被测组分以及内标，并且按照本文叙述的方法进行样品处理的工作。测定结果见表2，测定的结果表明，平均相对标准偏差（RSD）的值为l.0%，平均回收率为96.45%，通过数据证明完全可以满足常规分析方法的相关要求。 3 结论

本文所用的检测方法具备操作过程简单，分离效果良好，精密度高，结果准确无误，

是检测食品中防腐剂的优良方法。 参考文献：

[1] 牟冠文,李光浩.食品防腐剂的概况及其检测方法[J].食品与发酵工业,2006,32(10)：103-107.DOI:10.3321/j.issn:0253-990X.2006.10.026. [2] 严蓓蓓,孙芸,熊晓辉等.食品防腐剂的检测新技术进展[J].中国调味 品 ,2008,33(6)：20-23.DOI:10.3969/j.issn.1000-9973.2008.06.001. [3] 侯芳菲.分光光度法在食品防腐剂检测中的应用[J].农业工程技术·农产品加工业,2013,(6):：30-33.